PCR新手必看:区分各种PCR
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- 发布时间:2024-11-13 03:56:26
各种PCR技术各有特点,区分起来并不复杂。
首先,要了解的是普通PCR,它以双链DNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增特定DNA序列。产物通过琼脂糖凝胶电泳检测,只适用于定性分析。
接下来是实时荧光定量PCR(qPCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR),主要以cDNA为模板,对扩增产物进行定量分析,为科学研究提供了精确的数据支持。qPCR技术中,水解探针法和荧光染料法是常用手段。
逆转录PCR(RT-PCR)专用于RNA转录为cDNA的反应,再以cDNA作为模板进行PCR扩增。结果只能定性,无法进行定量分析。
实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)是RT-PCR与qPCR的结合,用于RNA的转录产物定量分析,进一步提高了实验的精确度。
数字PCR(dPCR)是第四代PCR技术,采用泊松分布原理,将样品分配到微反应单元,实现核酸的绝对定量,提高了检测的灵敏度和准确性。
总结一下,各种PCR技术在应用上各有侧重,选择合适的技术对实验结果至关重要。从普通PCR到实时荧光定量PCR,再到逆转录PCR和数字PCR,每一种技术都有其独特之处,帮助我们深入理解生物分子的结构和功能。